세포주개발 및 생산/정제기술

1. Host cell optimization

– 형질개량형 CHO-ks1세포

– Serum-free suspension culture adapted

– Chemically defined medium 사용

– 개발된 세포주의 serum-free adaptation절차를 생략해 최대 3개월 이상의 개발기간 단축이 가능함

2. Gene sequence optimization

– Codon optimization

– mRNA structure optimization

– Cryptic splice site removal

3. Expression Vector optimization

– Express 2 genes (Heavy chain and Light chain) in one vector

– Small sized vector with increased efficiency

– Optimized expression of antibiotics selection marker genes

4. Transfection optimization

– Recombination based transfection method (proprietary method)

– Up to 12 fold increase in high level expressing stable cell line population

Population Method1 Method2 Fold increase
Positive cells mean-1 R3 Peak 653 1,845 2.8
Positive cells mean-2 R6 Peak none 6,518 10
Positive cells % R11 population 19% 35% 1.9
Highest Expression cell % R4 population 0.7% 8.4% 12

5. Signle cell growth optimization

6. Single cell selection method optimization

– MoFlo-XDP high speed cell sorter 사용

– 첨단 flow cytometer 기술을 사용해 고효율성 세포주 선별의 기능을 대폭 향상함

· Select cells with optimal expression levels with improved ranking consistency.
  Increase probability of finding optimal producers and select cells

· Cut cell line/antibody development times – avoid limiting dilution

· Reject poor performers at an early stage based on expression levels in situ

· Pick colonies with accuracy and confidence. Reduce risk of colony disturbance with robotics redesign.

· Improve workflow efficiency with fewer plate handling steps

7. Guaranteed clonality

– Clone Select Imager 사용

– 선별된 세포주가 한 개의 single cell로부터 자라난 colony임을 증명함

– 반복된 cloning의 필요성을 제거해 세포주개발 기간을 최대 3개월까지 단축함

– 96 well plate상에 seed된 single cell로부터 자라난 colony를 모니터함

8. 공정개발을 통한 생산성 향상

공정개발은 Ambr mini-bioreactor를 사용한 소규모 공정개발을 비롯해 Biostat 1 L에서 10 L규모의 bioreactor를 사용한 공정개발이 가능함

9. Non-GMP 시험 생산

Non-GMP 시험생산을 위해서는 50L 규모의 Biostat single use bioreactor가 갖추어져있음

10. GMP 시약품 생산

라파젠은 오송첨단의료산업진흥재단 임상시험신약생산 센터를 활용해 200L 또는 500L 규모의 GMP급 시약품 생산이 가능함

11. 정제 공정개발

정제 공정 개발은 AKTA Pilot을 사용해 가능함

12. 물리화학적 분석 실험

물리화학적 분석실험은 오송 첨단의료산업진흥재단 신약개발지원센터를 통해 사용이 가능한
첨단 분석 기기들을 사용해 진행함